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      抗原修復鍋的使用方法

       更新時間:2018-09-25 點擊量:2556

      抗原修復鍋Antigen Retriever

          
      免疫組織化學方法成功與否關鍵在于抗原決定簇的保存和暴露.組織經甲醛固定.甲醛的醛基與

      抗原蛋白的氨基交聯,使決定簇的構像改變.從而影響檢測蛋白表達.要充分暴露抗原決定簇,通

      常用到抗原修復鍋。強適于甲醛固定的組織,經石蠟包

      埋后進行免疫染色前的處理,配合特別的抗原修復緩沖液確保你得到搞質量的免疫染色效

      果。

      · 一次可以在6中不同緩沖液中運行,進行抗原暴露

      · 僅暴露抗原決定簇,不損傷組織的形態

      · 實驗結果穩定,結果重現性高

      · 系列的玻片在獨立環境中經過處理

      抗原修復鍋怎樣工作?

          看上去,抗原修復鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能*的“高壓鍋,主要用于抗原暴露

      的工作,主要的工作原理也是裝玻片的幾個分室可以達到高溫(>120°C)高壓。靈敏的傳感控制

      器來保持一定的溫度和壓力及一定的時間,這些工作參數都是經過嚴格的科學實驗得到的數

      據。當達到需要的溫度,抗原修復鍋會在該溫度下保持幾分鐘,之后鍋內玻片被冷卻2個多小

      時,特殊設材質的內鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。 

      誰是受益人?

          研究病理的實驗室,那里需要高質量染色照片(用來發表)的

          缺乏技術人員的實驗室,學生和博士后均可以處理玻片進行組織染色,且不需要很多時間來摸索

          小型病理實驗室,每天處理的玻片數量有限

      怎樣選擇一種緩沖液(Buffer

          如果你已經知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復,那么用抗原修復鍋時,這種緩沖

      液也同時適用的機會很大。我們提供四種即用型緩沖液R-Buffer A/B/C/U,同時也提供同種更加

      溫和的組織處理緩沖液,我們稱之G系列,R-Buffer AG/BG/CG/UG。

          
      選擇Buffer,主要考慮以下兩點:


      1.  抗原的自然特性以及所選擇的抗體


      抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開始的時候選擇抗原表達環境的

      適Buffer。以下是經驗供大家參考:

      Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-r

      elated) R: Buffer A (or AG).

      Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

      Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

      Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

      Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

      Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

      2.  固定液以及固定程度

      建議的組織切片的抗原修復處理是一種針對普通的適化狀態切片。如果用來切片的組織塊沒有

      充分固定,或者過固定(留在福爾馬林溶液中時間過長),或者用了其它的固定液,那么,處

      理組織切片的流程方案需要重新修訂,便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液。對于過固定的

      材料一般推薦用U buffer,或者在同一Buffer里面增加循環

       

      抗原修復鍋技術參數:

      Heigh

      335 mm

      Capacity

      9 litres

      Max. Instrument length

      228 mm

      Width.

      340 mm

      Net Weight

      4.5 kilos

      Internal chamber Dimensions (d/h)

      210/230 mm

      Max. Load Weight

      3.0kg

      Max. Single Fault Temperature

      133.3°C


      使用抗原修復鍋進行染色的效果示例


      1.福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結腸組織切片,經抗原修復鍋進行抗原暴露,R-

      Buffer C (pH 6.0),組織玻片降溫過夜,抗體MIB-1,抗原Ki-67,R-Detect HRP系統染色

       

      2. .福爾馬林固定,石蠟包埋,人乙狀結腸組織切片,經抗原修復鍋進行抗原暴露,R-

      Buffer A (pH 8.1),組織玻片降溫過夜,抗體#4B11,抗原CD8 (cell membrane),R-

      Detect HRP系統染色.

      儀器及配件的選購:

      貨號

      產品名稱

      規格

      62700-20

      Retriever 220 volt (內含3chamber

      1

      62705-01

      Slide Chamber

      3/pk

      62705-02

      Chamber Rack

      1

      62705-03

      Lifting Device

      1

      62705-05

      Cord Set (Europe)

      1

      緩沖液的選購:

      貨號

      產品名稱

      規格

      62706-10

      R-Buffer A (10x)

      250 ml

      62706-11

      R-Buffer B (10x)

      250 ml

      62706-12

      R-Buffer C (10x)

      250 ml

      62706-13

      R-Buffer U (10x)

      250 ml

      62707-10

      R-Buffer AG (2x)

      250 ml

      62707-11

      R-Buffer BG (2x)

      250 ml

      62707-12

      R-Buffer CG (2x)

      250 ml

      62707-13

      R-Buffer UG (2x)

      250 ml

       

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